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首頁技術(shù)服務(wù)工藝技術(shù)大腸桿菌發(fā)酵經(jīng)驗總結(jié)及注意事項

大腸桿菌發(fā)酵經(jīng)驗總結(jié)及注意事項

發(fā)布時間:2024-08-28 瀏覽次數(shù):842

首先,補料速率與比生長速率直接影響著乙酸的生成速率和積累量(主要是補料速率與比生長速率影響發(fā)酵液中的殘?zhí)橇?,進而影響),所以適當?shù)目刂蒲a料速率和比生長速率,對于控制乙酸的量有很好的效果。


其次,必須要保證充足的溶氧,并嚴格控制pH值,而且補酸堿的速率盡量緩和,不能太快;溫度對于蛋白的表達也有很重要的影響,較低的發(fā)酵溫度下所生產(chǎn)出的蛋白大多是有活性的,而較高的發(fā)酵溫度下產(chǎn)生的蛋白大多一包涵體形式存在。


第三,選取合理的誘導(dǎo)時間非常重要,一般的誘導(dǎo)時間選在指數(shù)生長后期,而且誘導(dǎo)時的比生長速率最好能控制在0.2之內(nèi),選在此時誘導(dǎo),1.將菌體的快速生長期與蛋白合成期分開,使這兩個階段互不影響,有利于蛋白的高表達;2.已經(jīng)得到了大量的菌體,而且菌體的生物量基本接近穩(wěn)定,不論是從動力學(xué)角度,還是能耗,物料成本方面,都比較合理。


第四,補料過程中的碳氮比也很重要。若氮源過高,會使菌體生長過于旺盛,pH偏高,不利于代謝產(chǎn)物的積累,氮源不足,則菌體繁殖量少從而影響產(chǎn)量;碳源過多,則容易刑場較低的pH,抑制菌體生長,碳源不足,則容易引起菌體的衰老和自溶。另外,碳氮比不當還會引起菌體按比例的吸收營養(yǎng)物質(zhì),從而直接影響菌體的生長和產(chǎn)物的合成。
根據(jù)自己的經(jīng)驗,一般情況下,對于一個穩(wěn)定的發(fā)酵工藝下,如果總是在固定的發(fā)酵時間段出現(xiàn)溶菌現(xiàn)象,而且能排除噬菌體和染菌的可能性后,那就可能是因為碳氮比不合理造成的??梢赃m當調(diào)整碳氮比。

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